Update GenomeCenter
Maastricht
2 oktober 2001
Dames en heren,
Zoals reeds bekend is het
Genoomcentrum Maastricht opgezet om genomicsonderzoek in Maastricht uit te
voeren en te faciliteren. In dit kader worden op dit moment grote investeringen
in laboratoria,
apparatuur en menskracht
gerealiseerd. Middels deze email-update willen wij u op de hoogte houden van de
stand van zaken. In ons tijdelijke laboratorium zijn reeds een aantal systemen
en protocollen operationeel dan wel in de laatste fase van optimalisatie. Hier
volgt een overzicht van wat op dit moment mogelijk is op het gebied van
Sequencing en Genotyping.
Sequencing:
Op de ABI3100 kunnen 16 samples per uur
gesequenced worden; max. Reads 400-450 nucleotiden. Onderzoekers leveren in
principe de samples zelf aan
(liefst in veelvouden van 16) en zijn hierdoor zelf verantwoordelijk voor de
kwaliteit van hun materiaal. Eventueel kan de sequencing-chemie (ABI BigDye v2 of v3) bij ons worden
verkregen. De samples worden door ons gerund en geanalyseerd, tenzij anders is
afgesproken (bijvoorbeeld voor grote projecten). De resultaten worden als kleurenprint en
op diskette aan de onderzoeker verstrekt. De prijs per sample is voorlopig vastgesteld
op Fl. 8,00. Protocollen en overige info zijn te verkrijgen bij Rob Janssen.
Multiplex SNP detectie:
Het multiplex SNaPshot
systeem van Applied Biosystems is operationeel. Met dit systeem kunnen per reactie
tussen de 1 en 10 SNP’s simultaan worden gegenotypeerd middels de
PCR-primerextensie technologie. Deze reacties kunnen in 96-wells format in 1
werkdag worden uitgevoerd. De electroforese en detectie van de producten op de
ABI3100 neemt 30 minuten per 16 samples in beslag. De analyse van de data
gebeurt op dit moment nog handmatig maar er wordt gewerkt aan software voor
automatische analyse. De
kosten per genotype zijn sterk afhankelijk van hoeveel SNP's die per reactie
getest worden. Basisprotocollen en prijsinfo zijn te verkrijgen bij Rob
Janssen. Omdat deze technologie
zich met name leent voor
medium- tot high throughput SNP projecten zullen met de betreffende
onderzoekers specifieke afspraken
moeten worden gemaakt. Geinteresseerden kunnen hiertoe het best contact
opnemen met Bert Smeets (hoofd Genoomcentrum).
Microsatelliet/STR-markers:
Fluorescent gelabelde
markers (gebruikt in genome screens, koppelingsonderzoek en LOH studies) kunnen
worden gerund en geanalyseerd op de ABI3100 met behulp van Genescan software.
Afhankelijk van de lengte van het grootste PCR-produkt neemt de electroforese
en detectie van 16 samples tussen de 25 en 50 minuten in beslag. Onderzoekers
leveren in principe de samples zelf aan (liefst in veelvouden van 16) en zijn hierdoor
zelf verantwoordelijk voor de kwaliteit van hun materiaal.
De samples worden door ons
gerund en geanalyseerd, tenzij anders is afgesproken (bijvoorbeeld voor grote
projecten). De resultaten worden als kleurenprint aan de onderzoeker verstrekt.
De prijs per sample is voorlopig vastgesteld op Fl. 8,00. Er is ook een
markerset (afstanden 10 cM) aanwezig
om een volledige genome scan
uit te voeren. Hierover moeten apart afspraken worden gemaakt.
Additionele info is te
verkrijgen bij Rob Janssen en Bert Smeets.
Rapid Agarose Gel
Electrophoresis (RAGE):
Het Genoomcentrum beschikt over 2 RAGE
systemen waarop tot 96 DNA- en/of PCR samples in ongeveer 10 minuten middels
agarose-gelelectoforese op grootte gescheiden kunnen worden. Dit systeem is zeer geschikt voor
de analyse van meer conventionele mutatiedetectie technieken zoals
allel-specifieke PCR en
PCR-RFLP, maar ook voor bijvoorbeeld grootschalige controle van minipreps. Meer
info bij Rob
Janssen.
Met vriendelijke groet,
de medewerkers van het
Genoomcentrum Maastricht.
If you don’t want to receive this newsletter please send an e-mail to rosy.engelen@gen.unimaas.nl